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用尊龙凯时人生就博测定左旋咪唑毒性的方法

发布时间:2025-01-26   信息来源:尊龙凯时官方编辑

左旋咪唑是一种合成驱虫药,广泛应用于兽医学,主要用于治疗由线虫引起的寄生虫感染。该药物通过靶向线虫乙酰胆碱离子通道受体发挥作用。近年来,除了医学领域,左旋咪唑在研究方面也有广泛应用,尤其是在秀丽隐杆线虫的麻痹实验中,能够有效诱导线虫瘫痪,为神经元功能和肌肉生理学的研究提供了重要的实验工具。

用尊龙凯时人生就博测定左旋咪唑毒性的方法

为了帮助研究人员理解毒理学实验,以下是一个应用左旋咪唑的实验例子,供科研工作者参考,并可作为应用不同可溶性药物进行毒性研究的框架。

实验材料

- 带盖6孔板
- NGM培养基
- M9缓冲液
- 左旋咪唑原液:100mM溶液
- 同步成虫种群
- WMicrotrackerArena设备

实验操作

1. 微孔板制备:按照标准程序制备NGM;在加入盐和胆固醇后,将左旋咪唑立即加入55°C的NGM琼脂溶液中;
2. 将左旋咪唑平板未接种OP50,制备后两周内可使用,并保存在4°C的容器中;
3. 实验开始前,将模板降至室温进行测定。
4. 在NGM培养皿中培养同步的成虫种群(OP50);
5. 用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出,转移至15毫升无菌试管中;
6. 让蠕虫静下来,倒入上清液,避免扰动沉淀;
7. 用5ml M9缓冲液进行洗涤,轻轻摇动或翻转管;
8. 重复以上步骤,倒出上清,加入3ml M9缓冲液;
9. 计数三份样本中每10μl的虫数,并计算平均值;
10. 制备悬浮液,得到[35虫/10μl];
11. 将10μl虫液转移至6孔板;
12. 使用WMicroTrackerARENA观察蠕虫活动。

备注:至少进行3次技术重复和2次生物重复。

实验结果

实验结果显示,左旋咪唑对N2运动活性的剂量抑制反应曲线评估了不同浓度(0µM(对照)、100µM和200µM)的治疗效果。在6孔板中,每孔挑选35个年轻成虫N2,并在23°C下记录4小时的运动活动。数据代表四个独立实验的平均值。

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